使用 ABW? Matrigengel 基底膜基質(zhì)培養(yǎng)的細(xì)胞,如果需要進(jìn)行切片或者免疫組織化學(xué)及免疫熒光檢驗(yàn),該怎樣固定呢?如何避免解聚?
jie***
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時(shí)間:2022-10-11
可以使用 2%濃度的多聚.甲.醛進(jìn)行固定。為避免固定后出現(xiàn)解聚的情況,可以加入 1%濃度的戊.二.醛。戊.二.醛作為固定劑,常用于電鏡觀察。如果用戶需要進(jìn)行免疫熒光檢驗(yàn),加入戊.二.醛后,會(huì)出現(xiàn)明顯的背景熒光。為了解決這一問題,我們建議用戶在固定之后,使用 NaBH4 進(jìn)行淬滅。NaBH4 極易氣泡,進(jìn)行該步驟時(shí),必須在水平操作臺(tái)上小心操作,避免晃動(dòng),盡量減少氣泡的形成。另外,用戶也可以嘗試使用較低濃度的戊.二.醛進(jìn)行固定,如 0.1%到 0.5%,濃度越低,背景熒光信號(hào)越少。